Авторы фб вк: Рейтинг авторов Фейсбук

Когда вы используете электронную почту для продвижения своей книги, люди увидят вашу подпись. Если вы добавите ссылки на свой веб-сайт и учетные записи в социальных сетях, он должен выглядеть примерно так:

Джейн Смит, автор [ Название книги ] [www.BookWebsite.com] Найди меня на [Facebook] Следуйте за мной на [Twitter]

4. Поставьте отметку «Нравится» на других страницах авторов Facebook или связанных с ними публикациях

Вы не только увидите, как другие авторы управляют своими страницами, но, возможно, им тоже понравится ваша страница.

5. Рассмотрите возможность покупки рекламы в Facebook

рекламы в Facebook позволяют настроить таргетинг на группу людей, которые, скорее всего, купят вашу книгу. Вы можете установить пожизненный или ежемесячный бюджет и ориентироваться на пользователей с определенными интересами или тех, кто читает похожие книги.

Стратегии и советы

Что размещать

Ваши сообщения в Facebook должны представлять собой смесь саморекламы, изображений, текстовых сообщений, ссылок на статьи и всего остального, что вы считаете интересным и которое, по вашему мнению, понравится вашему сообществу. Хотя жестких правил о том, что следует публиковать, не существует, у вас есть несколько вариантов, чтобы заинтересовать аудиторию:

1. Публикуйте сообщения о вещах, связанных с вашей книгой, написанием или публикацией.

Это могут быть изображения, цитаты известных авторов или новые разработки, написанные вами.

2. Делитесь фотографиями и видео других людей.

Делитесь сообщениями с соответствующих страниц. Распространение их контента — это быстрый и простой способ установления контактов, а также отличный способ публиковать отличные фотографии и видео для ваших подписчиков.

3. Проведение конкурсов.

Призом может быть бесплатная копия вашей книги. Принять участие в конкурсе должно быть достаточно просто: заполнить бланк или ответить на вопрос.

4.Имейте функцию поклонника месяца.

Если у вас будет больше пары сотен фанатов, выберите одного и вручите им приз или опубликуйте их фотографию вместе с книгой.

5. Объявите о подписании книги.

Используйте мероприятия Facebook, чтобы приглашать фанатов на автограф-сессии в их районе.

6. Покажите своим поклонникам, что вы заботитесь.

Вовлеките их в процесс написания вашего следующего проекта. Проведите опрос по именам персонажей, позвольте им выбрать свою любимую обложку книги или спросите, какую книгу читать дальше.Поклонники хотят поговорить с вами, они хотят внести свой вклад и они хотят чувствовать себя вовлеченными.

Когда отправлять

Всегда полезно публиковать сообщения, когда большинство ваших поклонников в сети, потому что у вас будет больше шансов на участие. Facebook имеет встроенную аналитику, которая дает вам ценную информацию о вашем сообществе, в том числе о том, когда они часто бывают на Facebook.

Когда вы находитесь на странице своего автора, нажмите Insights прямо под панелью поиска Facebook. Затем нажмите «Записи», чтобы узнать, в какое время большинство ваших поклонников в сети.Он может быть разным для каждого дня недели, но если вы наведете курсор на определенные дни, вы также сможете увидеть эту информацию. Публикация сообщений в периоды высокой загруженности может повысить вашу заметность на Facebook.

Переведутся ли лайки на страницу Facebook в продажи книг?

Общая цель продвижения себя на Facebook — привлечь внимание к своей работе и к себе как к автору. Чем больше у вас подписчиков, тем больше у вас шансов рассказать о своей книге.

При этом, больше лайков или подписчиков не обязательно означает больше продаж.Отслеживать потенциальных покупателей через Facebook сложно, но это не умаляет важности создания присутствия в Facebook. Если вы установите это присутствие и удержите своих подписчиков, люди с большей вероятностью будут делиться информацией о вас и вашей книге.

Последние мысли

Ваш подход к Facebook должен быть важнее количества. Более высокий уровень взаимодействия всегда благоприятствует большему количеству фанатов. Сосредоточьтесь на человеческом аспекте Facebook, а не на статистике.Пользователи останутся на странице вашего автора, если сочтут ваш контент ценным или интересным.

Хотя ваша страница в Facebook предназначена для профессионального использования, помните, что вы можете и должны получать удовольствие, продвигая свою работу.

Есть вопросы? Сообщите нам об этом на Facebook.

Как Mill City Press помогает

Наш отдел маркетинга поможет вам создать профессионально выглядящую страницу в Facebook и предоставит вам шаблон планирования в социальных сетях, чтобы начать новую страницу. Мы также можем помочь с рекламой в Facebook, чтобы ваша книга увидела людей, которые, скорее всего, ее купят.

Сравнение страницы автора в Facebook и профиля в Facebook

Краткий обзор: профиль и страница

Изображение слева является примером профиля Facebook из нашего Content Manager. В профиле вы можете увидеть ее полное имя, вступление, список друзей и вкладки для ее хроники, о разделе, друзьях, фотографиях и т. Д.

Справа — пример страницы Аманды в Facebook. Вы можете увидеть ее имя, тип страницы (выбирается из предварительно выбранных категорий при настройке страницы), сколько людей она любит, о чем и многое другое.Вы также можете добавить на эту страницу призыв к действию, чтобы побудить поклонников зарегистрироваться, сделать покупки сейчас, или другие призывы к действию.

Теперь, когда вы знаете основы, мы можем глубже погрузиться в различия между профилем и страницей.

Профиль Facebook

Профиль Facebook — это ваша личная страница профиля. Здесь вы можете оставаться на связи с друзьями, семьей, коллегами и знакомыми; делиться личными фотографиями; и публиковать новости о своей жизни.

В профиле Facebook вы должны отправлять запросы на добавление в друзья, чтобы связаться с людьми, которых вы знаете.Люди также могут отправлять вам запросы о дружбе, и вы можете принять или отклонить любой запрос. Скорее всего, вы не захотите принимать дружбу от людей, которых вы не знаете на Facebook, потому что у них будет доступ к личной информации, фотографиям и контактной информации, которые вы укажете в своем профиле.

Facebook требует, чтобы вы использовали свое настоящее имя в этих учетных записях, чтобы все знали, с кем они связываются, и чтобы сократить количество учетных записей, связанных с мошенничеством и спамом. Если Facebook обнаружит, что вы используете вымышленное имя, они могут заблокировать вашу учетную запись.Не забудьте управлять настройками конфиденциальности Facebook, чтобы вы могли контролировать, кто что видит на вашей странице.

Думайте о профиле Facebook как о своем доме: вы должны приглашать или принимать людей в свой дом, иначе они не смогут взаимодействовать с вами.

• Возможность взаимодействия с группами в Facebook (отличная возможность для общения)
• Ваши обновления будут видны большему количеству людей, которых вы знаете

• Нет статистики или данных о том, когда ваши друзья в сети или демографические данные
• Нет платной рекламы
• Риск закрытия учетной записи, если вы слишком часто продвигаете свой «бизнес» (книгу) через свой профиль
• Максимальное количество друзей

Страница Facebook

Страница Facebook — это общедоступная страница для компаний, общественных деятелей или художников, которые продвигают свой продукт или бренд.Кто угодно может искать и находить вашу страницу в Facebook и ставить ей лайки. Как автор, здесь вы делитесь обновлениями о своей книге, мероприятиями по чтению, рекламными акциями и всем остальным, чем вы хотите поделиться, напрямую связанным с вашей жизнью как автора.

Думайте о странице Facebook как о своей компании: любой может найти и посетить вашу компанию, потому что она публичная.

• Подробная статистика и анализ поведения ваших поклонников на Facebook (например, когда большинство из них находятся в сети, демографические данные или какие сообщения работают лучше всего.)
• Возможность продвигать свой контент, страницу и другие действия с помощью платной рекламы в Facebook или расширенного контента
• Кнопка призыва к действию (например, подпишитесь на рассылку новостей, купите книгу или сделайте покупки сейчас)
• Возможность пройти проверку в Facebook, если вы являетесь или стали известным общественным деятелем
• Неограниченное количество вентиляторов
• Дополнительные параметры вкладок

• Низкая видимость вашего контента, если вы не платите Facebook, чтобы показать его своим подписчикам
• Снижение охвата, если ваш контент не имеет сильного начального взаимодействия
• Невозможность взаимодействия с группами в Facebook

Здесь все может быть непросто: вам необходимо иметь профиль Facebook, прежде чем вы сможете настроить страницу Facebook. Facebook расплывчато объясняет это, но, вероятно, они знают, кто ведет бизнес-страницу.

Если у вас нет профиля Facebook, следуйте инструкциям здесь, чтобы создать его.

Если у вас уже есть личный профиль на Facebook, следуйте инструкциям здесь, чтобы настроить свою страницу Facebook.

stfalcon-studio / SocialToolKit: Простая авторизация в социальных сетях для iOS. Поддерживает Facebook, Вконтакте и Instagramm

SocialToolKit предназначен для получения токена доступа из Facebook, VK или Instagram.Вы можете использовать его для получения токена из конкретной социальной сети или из нескольких (сейчас поддерживаются только Facebook, ВКонтакте и Instagram).

Как установить:

Требования:

iOS 9.0+

Swift 3.0

Установка с помощью CocoaPods:

 use_frameworks!
под "SocialToolKit" 

Как использовать:

Для Facebook:

Обновите эти три метода в вашем AppDelegate:

 импорт SocialToolKit

func application (_ application: UIApplication, didFinishLaunchingWithOptions launchOptions: [UIApplicationLaunchOptionsKey: Any]?) -> Bool {
SocialToolKit. sharedInstance.appFBDidFinishLaunchingWithOptions (приложение: приложение, launchOptions: launchOptions)
вернуть истину
}

func applicationDidBecomeActive (_ application: UIApplication) {
SocialToolKit.sharedInstance.appFBDidBecomeActive ()
}
        
func application (_ app: UIApplication, open url: URL, options: [UIApplicationOpenURLOptionsKey: Any] = [:]) -> Bool {
SocialToolKit.sharedInstance.appFBOpenURL (приложение: приложение, URL: URL, параметры: параметры)
вернуть истину
} 

2. Перейти к Info.plist, вторичный клик Info.plist и выберите OpenAs -> SourceCode.

Вставьте следующий фрагмент XML в тело файла непосредственно перед последним элементом.

  CFBundleURLTypes 
<массив>

         CFBundleURLSchemes 
        <массив>
 fb {ваш-идентификатор-приложения} 



 FacebookAppID 
 {идентификатор-вашего-приложения} 
 FacebookDisplayName 
 {ваше-приложение-имя} 
 LSApplicationQueriesSchemes 
<массив>
 fbapi 
 fb-messenger-api 
 fbauth3 
 fbshareextension 
 

• замените fb {your-app-id} идентификатором вашего приложения Facebook с префиксом fb. Например, fb123456. Вы можете найти свой идентификатор приложения на панели инструментов приложения Facebook — https://developers.facebook.com/apps.
• замените {your-app-id} идентификатором вашего приложения.
• замените {your-app-name} отображаемым именем, которое вы указали на панели инструментов приложения.
• замените {понятную для человека причину доступа к фотографиям} на причину, по которой вашему приложению требуется доступ к фотографиям.

3. В yor viewController добавить как действие кнопки (например):

 импорт SocialToolKit

SocialToolKit.sharedInstance.requestFacebookToken (разрешения: ["public_profile", "user_friends"], loginBehavior: FBSDKLoginBehavior.systemAccount, {(токен, ошибка) в
if error == nil {
print ("ТОКЕН: \ (токен)")
} еще {
print ("ОШИБКА: \ (ошибка? .localizedDescription)")
}
}) 

Для ВКонтакте:

1. Обновите этот метод в своем AppDelegate:

 импорт SocialToolKit

func application (_ application: UIApplication, open url: URL, sourceApplication: String?, annotation: Any) -> Bool {
        SocialToolKit. sharedInstance.appVKOpenURL (sourceApplication: sourceApplication, url: url)
        вернуть истину
} 

2. Перейдите в Project -> Targets -> Info -> URL Types и добавьте URL Schemes vk, например:

Схемы URL: vk1234567 Роль: Редактор

3. Перейдите в Info.plist, вторично щелкните Info.plist и выберите OpenAs -> SourceCode. И добавляем AppTransportSequrity:

  NSAppTransportSecurity 
        
             NSExceptionDomains 
            
                <ключ> вк.com 
                
                     NSExceptionRequiresForwardSecrecy 
                    ложь />
                     NSIncludesSubdomains 
                    <истина />
                     NSExceptionAllowsInsecureHTTPLoads 
                    <истина />
                
            
         

4. Добавить (обновить) LSApplicationQueriesSchemes:

  LSApplicationQueriesSchemes 
        <массив>
             vk 
             vk-share 
             vkauthorize 
         

Если вы используете FB iOS SDK и VK iOS SDK, это выглядит так:

  LSApplicationQueriesSchemes 
        <массив>
             fbapi 
             fb-messenger-api 
             fbauth3 
             fbshareextension 
             vk 
             vk-share 
             vkauthorize 
         

5. Затем в ViewController (например) используйте:

 SocialToolKit. sharedInstance.requestVKToken (разрешения: ["друзья", "фотографии"], appId: "идентификатор вашего приложения") {(токен, ошибка) в
if error == nil {
print ("ТОКЕН: \ (токен)")
} еще {
print ("ОШИБКА: \ (ошибка? .localizedDescription)")
}
} 

Для Instagramm:

1. В ViewController:

 @IBAction func instagramAction (_ sender: Any) {
        SocialToolKit.sharedInstance.requestInstagramToken (permissions: ["basic"], clientID: "your cliend id", redirectURI: "your redirect uri") {токен, ошибка в
            печать (токен)
            print (ошибка ?.localizedDescription)
        }
    } 

2. Зарегистрируйте клиента на https://www.instagram.com/developer
3. Затем перейдите в «Управление клиентами» -> «Безопасность» -> снимите флажок «Отключить неявный OAuth».
4. Добавьте свой uri перенаправления в Допустимые URI перенаправления.

ЛИЦЕНЗИЯ:

Авторские права (c) 2017 Stfalcon

Разрешение предоставляется бесплатно любому лицу, получившему копию этого программного обеспечения и связанных файлов документации («Программное обеспечение») для работы в Программном обеспечении без ограничений, включая, помимо прочего, права использовать, копировать, изменять, объединять, публиковать, распространять, сублицензировать и / или продавать копий Программного обеспечения и разрешить лицам, которым предоставлено для этого при соблюдении следующих условий:

Приведенное выше уведомление об авторских правах и это уведомление о разрешении должны быть включены в все копии или существенные части Программного обеспечения.

ПРОГРАММНОЕ ОБЕСПЕЧЕНИЕ ПРЕДОСТАВЛЯЕТСЯ «КАК ЕСТЬ», БЕЗ КАКИХ-ЛИБО ГАРАНТИЙ, ЯВНЫХ ИЛИ ПОДРАЗУМЕВАЕМЫЕ, ВКЛЮЧАЯ, НО НЕ ОГРАНИЧЕННАЯ, ГАРАНТИИ КОММЕРЧЕСКОЙ ЦЕННОСТИ, ПРИГОДНОСТЬ ДЛЯ КОНКРЕТНОЙ ЦЕЛИ И ЗАЩИТА ОТ ПРАВ. НИ В КОЕМ СЛУЧАЕ АВТОРЫ ИЛИ ДЕРЖАТЕЛИ АВТОРСКИХ ПРАВ НЕСУТ ОТВЕТСТВЕННОСТЬ ЗА ЛЮБЫЕ ПРЕТЕНЗИИ, УБЫТКИ ИЛИ ДРУГИЕ ОТВЕТСТВЕННОСТЬ, ВОЗНИКАЮЩАЯ ЛИ В РЕЗУЛЬТАТЕ ДОГОВОРА, ИЛИ ИНОСТРАННОМУ ИНОСТРАННОМУ ПОЛОЖЕНИЮ ВНЕЗАПНО ИЛИ В СВЯЗИ С ПРОГРАММНЫМ ОБЕСПЕЧЕНИЕМ ИЛИ ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ИЛИ ДРУГИМИ ДЕЯМИ В ПРОГРАММНОЕ ОБЕСПЕЧЕНИЕ.

Российский конкурент Facebook, ВКонтакте, чтобы развернуть эту ОДНУ кнопку Пользователи FB всегда хотели, но никогда не получали — RT World News

Российская социальная сеть «ВКонтакте» представила новую кнопку «Не нравится» — простую функцию, в которой пользователи Facebook жестоко отказывались, несмотря на годы упрашивания.Теперь Марк Цукерберг может утверждать, что это был русский заговор!

Об этой функции было объявлено в среду на конференции VK Content Day в Москве, и компания думает, что она поможет «оживить» раздел комментариев.

VK ответила на молитвы своих пользователей с помощью кнопки, которая появится в качестве опции рядом с кнопкой «Нравится» в комментариях, давая пользователям возможность выразить неодобрение или несогласие, не оставляя на самом деле собственных комментариев. Достаточное количество антипатий сделает комментарий невидимым.

« Нелюбовь» — далеко не та функция, которую хотят только жители ВКонтакте. Пользователи Facebook умоляли генерального директора Марка Цукерберга о такой собственной кнопке с тех пор, как кнопка «нравится» была впервые представлена ​​в 2009 году, но им было отказано в кликабельном катарсисе. В то время как в 2016 году платформа развернула реакцию на эмодзи, дав пользователям возможность отвечать на комментарии и сообщения, которые им не нравились, с «грустным лицом» или «сердитым лицом», не должно было быть никакой инверсии культового синего большого пальца Facebook. жест.

Сам Цукерберг сказал, что он обеспокоен тем, что такая кнопка будет использована для «унизить» поста других, очевидно, не подозревая о том, какие комментарии люди оставляют, когда у них нет доступа к такой кнопке.

Кнопка «Не нравится» была настолько популярна среди пользователей Facebook, что было создано несколько петиций, чтобы попытаться изменить мнение Цукерберга. Мошенники даже заманивали жертв на сайт с вредоносным ПО, не давая возможности добавить кнопку «Не нравится» на свой Facebook раньше всех.

Быть избитым «неприязнью» ВКонтакте — не единственное недавнее разочарование для Facebook. Крупнейшая в мире социальная сеть (и ее дочерняя компания Instagram) недавно запретили смайлики из баклажанов, персиков и капель воды при использовании в «сексуальном контексте» , чтобы заглушить контент, который «способствует, поощряет или координирует. сексуальные контакты между взрослыми ».

Для платформы, которая представила «Facebook Dating» всего несколько месяцев назад, гигант социальных сетей, похоже, не понимает, что отговорка от сексуальных контактов не приведет к привлечению клиентов.

Facebook: у нас нет возможности запретить разжигание ненависти и фальшивые новости. Также Facebook: наш алгоритм может со 100% точностью определить намерение пользователя использовать смайлик-фрукт https://t.co/uVktjJ5geM

— Спенсер Каллаган (@Senturion) 31 октября 2019 г.

Не говоря уже о том, кому будет поручено оценивать контекст сообщения, содержащего фрукты и овощи, действия Facebook вызвали насмешки со стороны пользователей, которые размышлял, что платформа может пытаться подать сигнал добродетели, чтобы отвлечься от гнева по поводу своей политической рекламной политики после того, как Twitter успокоил критиков, запретив всю политическую рекламу.

Занимая 12-е место в рейтинге самых популярных веб-сайтов в мире, ВКонтакте является популярной социальной сетью в России с более чем 38 миллионами пользователей в месяц из 100 миллионов, которые входят в систему с российских IP-адресов.

В то время как его 477 миллионов аккаунтов по всему миру значительно превосходят армию Facebook, состоящую из более чем 2 миллиардов зарегистрированных пользователей, количество ВКонтакте растет. В своем блоге VK объявила, что количество авторов и публикуемых историй увеличивается на 50 процентов в годовом исчислении, в то время как количество комментариев увеличилось на 49 процентов по сравнению с 2018 годом.Платформа также выпустила конкурента Patreon под названием VK Donut.

Тем временем Facebook выдыхается. В прошлом году он фактически потерял ежедневных пользователей среди всех возрастных групп в США, и этот спад был особенно заметен среди молодых пользователей.

Платформа пыталась укрепить свою преследуемую скандалами репутацию, выставив свой брендинг в Instagram и WhatsApp, но антимонопольные расследования и расследования конфиденциальности вырисовывались на уровне штата и на федеральном уровне, а также десятки судебных исков по делу Cambridge Analytica и многочисленные обвинения в политически мотивированной цензуре — общественное мнение, похоже, настроено против нее.

Думаете, вашим друзьям будет интересно? Поделись этой историей!

Женитьба на генеральном директоре Кими Л. Дэвис в Inkitt

Я скрестил правую ногу над левой, взглянув на часы, которые показали мне, что я сижу здесь уже час. Сжимая руками файл, я ждал своей очереди, чтобы пройти в кабинет генерального директора на собеседование. Но когда я огляделся, обратив внимание на почти пятьдесят женщин, сидящих в ожидании своей очереди, я понял, что пройдет много времени, прежде чем мне позволят войти, что нисколько не уменьшило мое беспокойство.Мне нужно было как можно скорее закончить это интервью, мой младший брат был дома один, что не было идеальным для его нынешнего состояния, и мне нужно было пойти к нему.

Дверь кабинета генерального директора открылась, и из нее вышла женщина со светлыми волосами, плача. Ее тушь стекала тонкими черными струйками, а серые глаза были налиты кровью. Не говоря ни слова, женщина бросилась к одинокому лифту, стоявшему на полу, и несколько раз нажимала кнопку вызова, пока лифт не прибыл. Войдя в лифт, ее существование исчезло, когда двери закрылись.

«Номер двадцать семь, мисс Ханна, мистер Маслоу увидит вас сейчас», — монотонно сказала дама на стойке регистрации.

Дама с угольно-черными волосами и зелеными кошачьими глазами грациозно встала и поправила свое уже гладкое розовое платье. С соблазнительной улыбкой она уверенно зашагала в офис. Я не понимала, как она не мерзнет в этом тонком платье?

Моя уверенность пошатнулась в двадцать седьмой раз, когда я увидел, что еще одна красивая женщина пришла на собеседование.Несмотря на то, что меня не интересовал сам этот человек, меня интересовало то, что он предлагал. Деньги.

Гидеон Маслоу владел крупнейшей в мире бизнес-империей, он был олицетворением богатства, он практически был королевской семьей. В этом мире не было ничего, что мужчина не мог бы купить. Он владел пятью частными островами и планировал купить один из Багамских островов; кое-что, что я узнал после того, как изучил его, когда увидел газетную рекламу.

В один прекрасный день, когда я просматривал газету в поисках третьей работы, я наткнулся на необычное объявление.

Требуется невеста

Гидеон Маслоу, всемирно известный предприниматель, нуждается в потенциальной невесте, которая сможет обеспечить ему наследника менее чем через год, который унаследует его империю в будущем. Г-н Маслоу заплатит женщине один миллион фунтов наличными после рождения ребенка и окончания годичного контракта.

Интервью с потенциальной невестой г-на Маслоу начнутся с 6 декабря 2015 года по 7 декабря 2015 года. Все заинтересованные кандидаты должны принести свои резюме, содержащие каждую мелочь о себе; их возраст, раса, происхождение, генетические заболевания и т. д.Кандидаты с недостоверной информацией будут дисквалифицированы.

За дополнительной информацией обращайтесь в штаб-квартиру Maslow Enterprises;
Контактный номер: xxx-xxxxxxx

Видеть огромную сумму, которую платил мужчина, было единственной причиной, по которой я сидел возле его офиса, ожидая своей очереди, игнорируя судороги в заднице из-за того, что так долго сидел. Когда я увидел сумму, я понял, что денег хватит на операцию моему брату, и мне нужно было сделать все возможное, чтобы убедиться, что мистерМаслоу выбрал меня в жены. Все, что мне нужно было сделать, это дать ему наследника, и тогда я смогу спасти жизнь своему брату. Мне просто хотелось, чтобы он выбрал меня.

Дверь снова открылась, и женщина Ханна вылетела из комнаты, выглядя бледной. Губы ее сжались в рычании. Яростно ворча, она рванулась к лифту.

«Этот тоссер отверг меня, потому что я не девственница! С какой он планеты ?! » — крикнула она, вызывая вздохи у нескольких женщин. Двери лифта открылись, и Ханна не теряла времени зря.

Как только двери лифта закрылись, я вздохнула с облегчением, радуясь тому, что я все еще девственница. Я начал возиться с ожерельем на шее. Нико, мой младший брат, подарил мне ожерелье на мое девятнадцатилетие. В нем не было ничего экстравагантного, всего лишь простой браслет из розового золота с тонкой позолоченной цепочкой, но он значил для меня мир. Прошло четыре года, и я никогда его не снимал, это было похоже на мой талисман.

«Номер двадцать восемь, мисс Алиса, мистер Маслоу увидится с вами сейчас», — сказала дама на стойке регистрации тем же ровным голосом.

Мое сердце начало биться, когда я медленно встала, изо всех сил стараясь выглядеть изящно, делая это так же, как и другие женщины, но я знала, что не достигла особого успеха. Затянув пояс пальто вокруг талии, я прижал папку к груди и медленно пошел к деревянной двери, которая могла, а могла и не помочь спасти жизнь моего брата, мое сердце стучало в грудную клетку.

Глубоко вздохнув, я осторожно повернул ручку и вошел в кабинет Маслоу Гидеона. Офис был красивым, мягко говоря.Интерьер был не шикарный, но выглядел дорого. Там стояли два белых полноразмерных дивана: один перед огромным стеклянным окном от пола до потолка, а другой напротив первого, со стеклянным столом посередине. Справа от меня был письменный стол со всеми аккуратно разложенными канцелярскими принадлежностями, за которым стоял большой темно-коричневый вращающийся стул. У стены стояло несколько больших шкафов из темного дерева, а несколько растений в горшках, искусно расставленных в комнате, завершали образ.

На кушетке напротив стеклянного окна сидели четверо безукоризненно одетых мужчин.Все они были одеты в дорогие дизайнерские костюмы. Тот, что сидел в левом углу, выглядел самым старым с темно-каштановыми волосами, слегка поседевшими по краям, с пронзительными карими глазами. Его лицо было жестким, с несколькими морщинами, которые намекали на его преклонный возраст.

Рядом со старшим мужчиной сидел молодой человек не старше двадцати лет. Он был похож на человека слева, за исключением того, что у него были вьющиеся светлые волосы и глаза цвета морской волны. У него было гладкое лицо и худощавое тело.

Рядом с молодым человеком сидел мужчина лет двадцати семи.У него был острый подбородок, густые каштановые волосы и пронзительные глаза цвета морской волны. Он выглядел смутно знакомым, однако я не мог вспомнить, где я его видел. От одного взгляда на него у меня по спине пробежала дрожь. Мужчина выглядел смертельно опасным, готовым нанести удар. Я знал, что он был из тех людей, которые без колебаний одолеют своего противника, кем бы он ни был.

Следующий мужчина в очереди был лет двадцати пяти, с вьющимися каштановыми волосами и мягкими карими глазами. Его красивое лицо поддерживало мягкую улыбку, которая странным образом успокаивала меня.Он выглядел немного громоздким, как будто много тренировался. Но он мне очень нравился; Из них четверых, последний не заставил меня почувствовать себя так, как будто я только что вошел в логово льва.

«Садитесь, мисс, у нас мало времени», — сказал смертоносный человек.

Я быстро сел на кушетку напротив и положил свою папку на стеклянный стол, который смертоносный человек немедленно взял, открыл ее, быстро просматривая ее содержимое, его лицо было лишено эмоций.

«Как вас зовут?» — спросил самый старший из четырех мужчин.У него был низкий голос, и он говорил целеустремленно.

«Алиса Гарднер, сэр», — вежливо ответила я, впиваясь ногтями в ладонь, чтобы не биться сердце.

«Откуда ты?» — спросил тот же мужчина.

«Ист-Энд, Лондон, сэр», — ответил я.

«Ты бедный», — заявил смертоносный мужчина с глазами цвета морской волны. Его голос был богатым и мягким, как растопленный шоколад, но в голосе его звучал опасный оттенок. Его глаза были жесткими, когда они внимательно изучали меня, заставляя меня чувствовать себя крысой под наблюдением.

«Я-я-» Я не мог подобрать слов. Я не мог отрицать того факта, что действительно был очень беден. Но услышав это в такой уничижительной манере, я почувствовал себя глупо, когда-либо подумывая о том, чтобы приехать сюда.

«Зачем вы пришли сюда?» — спросил самый младший из четырех.

Моя рука мгновенно потянулась к моему ожерелью, когда я почувствовал себя подавленным, сидя перед этими богатыми людьми. «Мне нужны деньги», — честно ответил я.

«Ого, очень честно, а мы думали, что ты исповедуешь свою бессмертную любовь к моему брату», — заявил крупный мужчина с веселой улыбкой на лице.

Опустив взгляд, когда мои щеки покраснел румянцем, я продолжил возиться с ожерельем. «При всем уважении, сэр, как я могу признаться в любви к человеку, о существовании которого я даже не подозревал два дня назад», — выпалил я, затем проклял себя за лепет.

«Ой, должно быть, это было больно, а, Гидеон», — поддразнил его громоздкий мужчина, глядя на своего брата, который выглядел так, будто хотел убить меня.

Мои глаза слегка расширились. Это был Гидеон? Гидеон Маслоу ?! Неудивительно, что он выглядел знакомым.Я видел его фотографии в Интернете. Он действительно выглядел как один из самых завидных лондонских холостяков.

«Зачем вам деньги?» — спросил Гидеон.

«У моего младшего брата ВСД, дефект межжелудочковой перегородки, у него дыра в сердце, и мне нужны деньги на его операцию», — ответила я, не отрывая пальцев от ожерелья.

«Значит, вы хотите выйти за меня замуж и предоставить мне наследника, чтобы получить деньги на операцию вашего младшего брата, верно?» — спросил он, как бы подтверждая то, что я только что сказал.

Я кивнул, надеясь, что он согласится на брак. «Да сэр.»

«Что заставляет вас думать, что я выйду за вас замуж?» — надменно осведомился он.

«Простите меня?»

«Изучив вашу информацию, я не совсем уверен, что хочу, чтобы вы были моей женой. Оба ваших родителя умерли из-за сердечных заболеваний, и ваш брат также страдает сердечным заболеванием, что означает, что в будущем есть большая вероятность того, что вы тоже будете страдать сердечным заболеванием, и я не хочу, чтобы мой ребенок у меня дефектное сердце », — заявил он.

«Необязательно, чтобы у меня была болезнь сердца», — возражала я.

«Да, может и нет, но есть и другие вещи. Вы только закончили среднюю школу, а это значит, что у вас нет высшего образования. Вы работаете в мусорном баре и на заправке, что означает антисанитарную среду, а это означает, что ваше тело наполнено всеми видами токсичных химикатов, которые вы вдыхаете, не говоря уже о том, что вы живете в Ист-Энде в Лондоне, месте для бедный, — возразил он, заставляя меня чувствовать себя маленьким после каждого слова.

«Единственная причина, по которой я не пошла в институт, заключалась в том, что оба моих родителя скончались, и мне пришлось заботиться о своем младшем брате. Я должен работать на двух работах, чтобы покупать лекарства для своего брата, и мне все еще нужно копить деньги на его операцию. Ист-Энд в Лондоне — это место, где я родился и вырос, я не могу и не буду извиняться за это , — объяснил я, отчаянно желая сбежать.

«Скажите, а вы когда-нибудь ели в дорогом ресторане? Вы когда-нибудь были на благотворительном мероприятии? » — спросил он.

«У меня нет таких денег, сэр, и если бы я сделал первое, что сделал бы, это сделал бы своему брату операцию, в которой он нуждался», — твердо ответила я.

«Ваш цвет волос натуральный?» — спросил Гидеон.

Проведя рукой по своим волнистым земляничным светлым волосам, я кивнул. «Да, это естественно, у моей мамы тоже были клубничные светлые волосы». Я ответил с улыбкой, ангельское лицо моей мамы вспыхнуло перед моими глазами.

«Интересно, однако, я должен сказать, что в тебе нет ничего, кроме того, что ты девственница, которая меня привлекает.Ни вашей генетики, ни вашего финансового положения, ничего. Я ищу женщину с классом и статусом, но, к сожалению, вам не хватает этих качеств. Я не ищу отношения на одну ночь, я ищу жену, и я просто не вижу в тебе жену, — заявил он, в его глазах не было ни тени эмоций.

«Я знаю, как быть женой», — защищалась я, пытаясь найти способ убедить Гидеона жениться на мне. Мне нужны были деньги для Нико, я пообещал себе, выходя из квартиры, что сделаю все возможное, чтобы убедить Гидеона жениться на мне.

«А теперь? Если ты станешь моей женой, я буду твоим приоритетом, а не твой брат, ни кто-либо другой, я, ты понимаешь это? » — спросил Гидеон.

«Я знаю, как разделить свое время в соответствии с моими приоритетами, говорю вам, вы не будете разочарованы», — твердо заявил я.

Гидеон покачал головой, и я знал, что его нельзя убедить. Мое сердце упало, мне пришлось искать другой способ получить деньги. Я не мог позволить Нико, моему младшему брату, моей единственной семье страдать намного дольше, мне просто нужно было найти прилично оплачиваемую работу.

«Прошу прощения, мисс Гарднер, я просто не думаю, что вы мне подходящая женщина. Однако я могу оплатить операцию твоему брату, — предложил Гидеон.

Покачав головой, я улыбнулся и встал. «Спасибо, но нет, спасибо, я бы предпочел заработать деньги на операцию брату. Возможно, я не богат, мистер Маслоу, но я тоже не занимаюсь благотворительностью. Взяв у него папку, я прижал ее к груди.

«Вы уверены? Это принесет большую пользу тебе и твоему брату, — настаивал Гидеон, но я не собирался сдвигаться с места.

«Мне может не хватать класса и статуса, но у меня есть достоинство и чувство собственного достоинства. Спасибо за ваше время, мистер Маслоу, я пойду, до свидания, мистер Маслоу, — заявил я. Повернувшись на каблуках, стараясь держать голову высоко поднятой, я вышел из офиса Гидеона Маслоу и покинул его жизнь.

Выйдя из высокого здания, которое было «Маслоу Энтерпрайзис», я снова начал возиться со своим ожерельем, поскольку тяжесть моих проблем и обязанностей угрожала меня сбить. Глядя на оживленную лондонскую улицу, в голове крутилась только одна мысль.

Как я теперь собирался платить за операцию Нико?

Что мне теперь делать?

Молекулы | Бесплатный полнотекстовый | Оценка Met-Val-Lys в качестве линкера, расщепляемого ферментами на границе почек для снижения поглощения почками 68Ga-меченных DOTA-конъюгированных пептидов и пептидомиметиков

1. Введение

3. Обсуждение

После подтверждения in vivo расщепления [ ⁶⁸ Ga] Ga-DOTA-AmBz-MVK (Ac) -OH на [ ⁶⁸ Ga] Ga-DOTA-AmBz-Met-OH и низкого удерживания в почках [ ⁶⁸ Ga] Ga-DOTA-AmBz-Met-OH, мы затем протестировали эту модифицированную конструкцию с вектором, нацеленным на PSMA, связанным с боковой цепью Lys.PSMA стал очень многообещающей мишенью для визуализации и лечения рака простаты. Однако из-за высокого уровня экспрессии PSMA в почках постоянно наблюдается высокое и устойчивое поглощение почками радиолигандов, нацеленных на PSMA, что приводит к неоптимальной чувствительности обнаружения поражений, прилегающих к почкам, и опасениям по поводу токсичности почек при использовании радиотерапевтических агентов. Идея включения расщепляемого линкера MVK в радиоактивно меченый DOTA-конъюгированный радиолиганд, нацеленный на PSMA, заключается в том, чтобы радиолиганд расщеплялся ферментами почечной щеточной каймы, когда он выводится через почки.Поскольку ожидаемый комплексный с радиометаллом DOTA-AmBz-Met-OH не сохраняется в почках, общее поглощение почками целевого радиолиганда PSMA, содержащего расщепляемый линкер MVK, будет снижено.

В заключение мы показали, что замена NOTA и аминобензильной группы в сообщенном линкере NOTA-MVK на DOTA и AmBz, соответственно, дает модельное соединение [ ⁶⁸ Ga] Ga-DOTA-AmBz-MVK (Ac) -OH, который все еще распознавался и специфически расщеплялся по амидной связи Met-Val за счет NEP. Связывание более объемного вектора, нацеленного на PSMA, с боковой цепью Lys в DOTA-AmBz-MVK увеличивало его стабильность в отношении NEP, но, возможно, также делало его уязвимость против другого фермента (ов), о чем свидетельствует образование неидентифицированного радиоактивного метаболита, который может задерживаться в почках.Тем не менее, поглощение почками полученного [ ⁶⁸ Ga] Ga-DOTA-AmBz-MVK (HTK01166) -OH было все еще ниже, чем у [ ⁶⁸ Ga] Ga-HTK01166. Эти данные продемонстрировали, что MVK может быть многообещающим расщепляемым линкером для использования для снижения почечного захвата радиоактивно меченных DOTA-конъюгированных пептидов и пептидомиметиков, нацеленных на опухоль. Эта стратегия может быть использована для повышения чувствительности обнаружения визуализирующих агентов поражений, прилегающих к почкам, и улучшения отношения доз, поглощенных опухолью к почкам, для радиотерапевтических агентов.

4. Материалы и методы

4.1. Общие методы.

4.2. Синтез Fmoc-1-Lys (пентиноил) -OtBu (2)

Fmoc-1-Lys (пентиноил) -OH ( 1 ) (2,05 г, 4,6 ммоль) в CH ₂ Cl ₂ (20 мл) добавляли трет-бутил-2,2,2-трихлорацетимидат (2,18 г, 10 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 22 часов и очищали колоночной флэш-хроматографией, элюируя смесью 1: 1 этилацетат / гексан до 100% этилацетата.Желаемый продукт 2 получали в виде белого твердого вещества (1,82 г, 79%). ¹ H-ЯМР (400 МГц, CDCl ₃ ) δ м.д .: 1,39–2,08 (м, 7H), 1,47 (с, 9H), 2,37 (т, J = 7,0 Гц, 2H), 2,52 (дт, J = 2,2, 7,0 Гц, 2H). 3,28 (м, 2H), 4,22 (т, J = 7,0 Гц, 2H), 4,39 (м, 2H), 5,42 (д, J = 8,0 Гц, 1H), 5,90 (шс, 1H), 7,31 (дт, J = 1,0, 7,4 Гц, 2H), 7,40 (т, J = 7,5 Гц, 2H), 7,60 (д, J = 7,4 Гц, 2H), 7,77 (д, J = 7,5 Гц, 2H). ESI-MS: рассчитано [M + H] ⁺ для Fmoc-1-Lys (пентиноил) -OtBu C ₃₀ H ₃₆ N ₂ O ₅ 505.3; найдено 506,0.

4.3. Синтез прекурсоров, конъюгированных с DOTA

4.3.1. Синтез DOTA-AmBz-MVK (Ac) -OH

Для синтеза DOTA-конъюгированного линкера DOTA-AmBz-MVK (Ac) -OH, смола Ванга Fmoc-Lys (Mtt) (шкала 0,05 ммоль, 0,5–0,8 ммоль / г загрузки) сначала набухали с использованием ДМФ. Защитную группу Mtt удаляли с использованием 2% TFA в DCM в течение 30 минут (5 минут, 6 раз) и нейтрализовали с помощью DIEA в DMF. Свободный амин ацетилировали с использованием уксусного ангидрида (20 экв.) / DIEA (20 экв.) / ДМФ.Затем с Fmoc на Lys снимали защиту с использованием 20% пиперидина в ДМФ и связывали с Fmoc-Val-OH (5 экв.) В присутствии активаторов HATU / HOAt (5 экв.) И DIEA (10 экв.) В ДМФ. Дальнейшее удлинение пептидной цепи проводили повторением стадий снятия защиты с Fmoc и связывания. Fmoc-Met-OH, Fmoc- (4-аминометил) бензойная кислота и, наконец, сложный эфир DOTA-трис (t-bu) (три-трет-бутил 1,4,7,10-тетраазациклододекан-1,4,7,10 -тетраацетат) были соединены в таком порядке. Пептид, конъюгированный с DOTA, отщепляли от смолы и одновременно снимали защиту, используя TFA: H ₂ O: триизопропилсилан (TIS): 2,2 ‘- (этилендиокси) диэтантиол (DODT) в течение 1.5 ч при комнатной температуре в соотношении 92,5: 2,5: 2,5: 2,5. Расщепленный пептид фильтровали и осаждали холодным диэтиловым эфиром перед очисткой с использованием колонки для полупрепаративной ВЭЖХ. Условия ВЭЖХ составляли 84/16 A / B при скорости потока 4,5 мл / мин. Время удерживания DOTA-AmBz-MVK (Ac) -OH составляло 14,1 мин. Элюаты, содержащие желаемый пептид, собирали, объединяли и лиофилизировали. Выделенный выход составил 12%. ESI-MS: вычислено [M + H] ⁺ для DOTA-AmBz-MVK (Ac) -OH C ₄₂ H ₆₇ N ₉ O ₁₃ S 938.5; найдено 938,4.

4.3.2. Синтез DOTA-AmBz-MVK (HTK01166) -OH

4.3.3. Синтез DOTA-AmBz-M (O) VK (HTK01166) -OH

DOTA-AmBz-M (O) VK (HTK01166) -OH, окисленной (сульфоксидной) версии DOTA-AmBz-MVK (HTK01166) -OH был синтезирован в качестве контроля с использованием той же стратегии синтеза и очистки, что и для DOTA-AmBz-MVK (HTK01166) -OH.Для этого Fmoc-Met-OH был заменен на Fmoc-Met (O) -OH. Условия ВЭЖХ составляли 74/26 A / B при скорости потока 4,5 мл / мин. Время удерживания и выход изолированного продукта составляли 8,3 мин и 2% соответственно. ESI-MS: вычислено [M + H] ⁺ для DOTA-AmBz-M (O) VK (HTK01166) -OH C ₇₈ H ₁₁₅ N ₁₇ O ₂₄ S 1706,8; найдено 1706,9.

4.3.4. Синтез DOTA-AmBz-Met-OH

Для синтеза ожидаемого расщепленного фрагмента DOTA-AmBz-Met-OH смола ClTCP (Cl) ProTide (0.Шкала 1 ммоль, загрузка 0,48 ммоль / г) набухали в ДМФ. Fmoc-Met-OH (5 экв.) В ДМФ, содержащем 1 M DIEA / 0,125 M KI, присоединяли к смоле. После удлинения с помощью Fmoc- (4-аминометил) бензойной кислоты и сложного эфира DOTA-трис (t-bu) пептид отщепляли от смолы с использованием TFA: H ₂ O: TIS: DODT в течение 1,5 ч при комнатной температуре в атмосфере 92,5 : 2,5: 2,5: 2,5 и очищали с использованием колонки для полупрепаративной ВЭЖХ. Условия HPLC были 83/17 A / B при скорости потока 4,5 мл / мин. Время удерживания составляло 10,2 мин, а выход изолированного продукта составлял 35%.ESI-MS: вычислено [M + H] ⁺ для DOTA-AmBz-Met-OH C ₂₉ H _{44 ​​} N ₆ O ₁₀ S 669,3; найдено 669,0.

4.4. Синтез нерадиоактивных Ga-комплексных стандартов

Ga-DOTA-AmBz-MVK (Ac) -OH, Ga-DOTA-AmBz-Met-OH, Ga-DOTA-AmBz-MVK (HTK01166) -OH и Ga-DOTA-AmBz -M (O) VK (HTK01166) -OH получали путем инкубации DOTA-конъюгированных пептидов и пептидомиметиков с GaCl ₃ (5 экв.) В буфере NaOAc (0,1 М, 300-500 мкл, pH 4.2) при 80 ° С в течение 15 мин. Реакционные смеси очищали непосредственно с использованием колонки для полупрепаративной ВЭЖХ. Элюаты, содержащие желаемый продукт, собирали, объединяли и лиофилизировали.

Для Ga-DOTA-AmBz-MVK (Ac) -OH условия ВЭЖХ составляли 82/18 A / B при скорости потока 4,5 мл / мин. Время удерживания и выход изолированного продукта составляли 11,2 мин и 78% соответственно. ESI-MS: рассчитано [M + H] ⁺ для Ga-DOTA-AmBz-MVK (Ac) -OH C ₄₂ GaH ₆₅ N ₉ O ₁₃ S 1005.4; найдено 1004,4.

Для Ga-DOTA-AmBz-MVK (HTK01166) -OH условия ВЭЖХ составляли 74/26 A / B при скорости потока 4,5 мл / мин. Время удерживания и выход изолированного продукта составляли 8,0 мин и 16% соответственно. ESI-MS: вычислено [M + H] ⁺ для Ga-DOTA-AmBz-MVK (HTK01166) -OH C ₇₈ GaH ₁₁₃ N ₁₇ O ₂₃ S 1757,7; найдено 1758,4.

Для Ga-DOTA-AmBz-M (O) VK (HTK01166) -OH условия ВЭЖХ составляли 74/26 A / B при скорости потока 4,5 мл / мин. Время удерживания и выделенный выход составляли 10.8 мин и 35% соответственно. ESI-MS: рассчитано [M + 2H] ²⁺ для Ga-DOTA-AmBz-M (O) VK (HTK01166) -OH C ₇₈ GaH ₁₁₃ N ₁₇ O ₂₄ S 887,4; найдено 887,5.

Для Ga-DOTA-AmBz-Met-OH условия ВЭЖХ составляли 83/17 при скорости потока 4,5 мл / мин. Время удерживания и выделенный выход составляли 10,5 мин и 72% соответственно. ESI-MS: рассчитано [M + H] ⁺ для Ga-DOTA-AmBz-Met-OH C ₂₉ GaH ₄₂ N ₆ O ₁₀ S 736.2; найдено 736,1.

4.5. Синтез

4.6. Ферментный анализ in vitro

Ферментативное распознавание синтезированных пептидов и пептидомиметиков определяли путем инкубации пептидов и пептидомиметиков, меченных ⁶⁸ Ga, с экстрагированными BBMV при 37 ° C в течение 1 часа. Для анализа аликвоты (25 мкл) раствора фермента (1,52 мг / мл) и ферментного буфера (250 мМ NaCl, 57,5 ​​мМ трис-основания; pH доведен до 7,5) смешивали в 96-луночном планшете с прозрачным дном и инкубируют при 37 ° C в течение 10 мин. Смеси также содержали 100 ч. / Млн аскорбиновой кислоты для предотвращения окисления остатка Met в тестируемых пептидах и пептидомиметиках во время анализа.Затем в лунку для теста добавляли радиоактивно меченый пептид (50 мкл, ~ 3,7 МБк). Контрольная лунка содержала фосфорамидон, мощный ингибитор NEP, в конечной концентрации 1 ммоль / л в дополнение к содержимому тестовой лунки. После 1 ч инкубации все реакции гасили равным объемом CH ₃ CN и центрифугировали при 13000 об / мин в течение 10 минут. Полученный супернатант собирали и анализировали, используя аналитическую колонку для ВЭЖХ, для идентификации и количественного определения радиоактивного метаболита (ов). Анализ проводили в двух экземплярах.

4.7. Культура клеток

Клетки LNCaP рака предстательной железы человека, полученные из ATCC (Манассас, Вирджиния, США), культивировали в среде RPMI 1640 с добавлением 10% FBS, пенициллина (100 Ед / мл) и стрептомицина (100 мкг / мл) при 37 ° С. ° C в увлажненном инкубаторе MCO-19AIC Panasonic Healthcare (Токио, Япония), содержащем 5% CO ₂ . При 80-90% конфлюэнтности клетки промывали стерильным фосфатно-солевым буфером, трипсинизировали и объединяли перед их подсчетом вручную с использованием счетчика 202C Bal Supply (Сильвания, Огайо, США).

4.8. ПЭТ / КТ-визуализация и биораспределение Ex vivo у мышей-носителей опухоли

Все исследования визуализации и биораспределения были выполнены на самцах мышей NOD-scid IL2Rg ^null (NSG) в соответствии с руководящими принципами, установленными Канадским советом по уходу за животными и животными. одобрено Комитетом по этике животных Университета Британской Колумбии. Для инокуляции опухолей мышей анестезировали путем ингаляции 2% изофлураном в кислороде и подкожно имплантировали 5 × 10 ⁶ клеток LNCaP ниже левого плеча.Исследования визуализации и биораспределения проводились только после того, как опухоли выросли до 5-8 мм в диаметре в течение 5-7 недель.

Для исследований ПЭТ / КТ через хвостовую вену вводили ~ 3-6 МБк меченого ⁶⁸ Ga индикатора. Для исследования блокирования 2-PMPA (0,2 мг) вводили совместно с индикатором. Мышам давали возможность восстановиться и свободно передвигаться по клеткам после инъекции трассера. Через 45 мин. Мышей снова вводили седативное средство и помещали на сканер. Сначала была проведена 10-минутная компьютерная томография для локализации и коррекции ослабления для восстановления изображений ПЭТ, прежде чем было получено 10-минутное изображение ПЭТ.Грелки использовались в течение всей процедуры, чтобы держать мышей в тепле.

Для исследований биораспределения ex vivo мышам вводили ~ 1,5-3 МБк меченного ⁶⁸ Ga индикатора. Через 1 час p.i. мышей умерщвляли, брали кровь из сердца и собирали интересующие органы / ткани, промывали PBS, промокали насухо, взвешивали и подсчитывали с использованием автоматического гамма-счетчика. Поглощение в каждом органе / ткани нормализовали к введенной дозе и выражали как процент введенной дозы на грамм ткани (% ID / г).

4.9. Количественная оценка радиоактивных метаболитов в крови и моче

Мышам-самцам NSG вводили 3–17 МБк пептида, меченного ⁶⁸ Ga. Для анализа крови мышей анестезировали 2% изофлураном в O ₂ и подвергали эвтаназии путем ингаляции CO ₂ через 5 минут p.i. Затем брали кровь путем пункции сердца, и кровь собирали в пробирку Эппендорфа с равным объемом CH ₃ CN. Затем каждую пробирку центрифугировали при комнатной температуре в течение 10-15 мин, и полученный супернатант собирали и анализировали с использованием аналитической колонки для ВЭЖХ для идентификации и количественного определения радиоактивного метаболита (ов) в крови.Для профилирования мочи мочу собирали после умерщвления мышей через 15 минут p.i. Образцы мочи также были собраны и проанализированы с использованием аналитической колонки для ВЭЖХ для идентификации и количественного определения радиоактивного метаболита (ов) в моче.

4.10. Статистический анализ

Литературных городов ЮНЕСКО, которые проводят Всемирный день поэзии в домашних условиях

В последние недели произошла глобальная вспышка коронавируса (COVD-19), в том числе во многих литературных городах ЮНЕСКО по всему миру.Наши мысли и восхищение направляются ко всем, кто ежедневно работает, чтобы защитить безопасность и благополучие своих сограждан по всему миру.

В этой развивающейся ситуации мы стали свидетелями беспрецедентного, но важного шага ЮНЕСКО по литературным городам по изменению дизайна Всемирного дня поэзии 21 марта 2020 года, чтобы сеть могла продолжать отмечать как можно больше в цифровом пространстве.

Тринадцать литературных городов, Эдинбург, Гейдельберг, Краков, Кухмо, Любляна, Манчестер, Мельбурн, Монтевидео, Ноттингем, Обидуш, Рейкьявик, Тарту и Ульяновск, разместили свои мероприятия Всемирного дня поэзии в Интернете с чтениями стихов, флеш-мобами, видео и публикациями. на цифровых платформах.Мероприятия будут чествовать поэтов и прославить одну из самых ценных форм культурного и языкового самовыражения. Другие Литературные Города готовы поделиться и отметить эти инициативы в своих социальных сетях.

Таким образом, Всемирный день поэзии будет отмечен во всем мире, даже в этот тревожный 21 марта 2020 года. Литературные города надеются подарить миру моменты радости и утешения и использовать силу творчества, чтобы предложить единство и силу городам и сообщества в эти трудные времена.

О Всемирном дне поэзии: Всемирный день поэзии отмечается 21 марта и впервые был объявлен ЮНЕСКО (Организация Объединенных Наций по вопросам образования, науки и культуры) на 30-й Генеральной конференции в Париже в 1999 году с целью поддержки языкового разнообразия посредством поэтического выражения. и увеличение возможности услышать языки, находящиеся под угрозой исчезновения.

Следуйте в Twitter и Facebook: #WorldPoetryDay

Ульяновск

В социальных сетях пройдет поэтический флешмоб с призывом к читателям поделиться стихами в сети.Видео будут размещены в социальных сетях местными, российскими и зарубежными поэтами. Следите за хэштегами # WPDULSK20 и #WorldPoetryDay в социальных сетях в FB, VK, Instagram и Twitter. Более

Эдинбург

Шотландская поэтическая библиотека Эдинбурга будет делиться поэтическими подкастами из своей коллекции каждый час в течение дня. Обязательно оставайтесь включенными и отмечайте все, что связано с поэзией. https://www.scottishpoetrylibrary.org.uk

Краков

В Кракове они попросили пару поэтов записать свое любимое стихотворение Чеслава Милоша.Каждый день, начиная с 18 марта, они будут издавать одного читающего поэта. Они также поделятся видео своего писателя ICORN, читающего на арабском языке. Каждый пост переведен на английский язык, а переводы стихов Милоша должны быть доступны в Интернете.

Ссылка на первое видео: https://www.facebook.com/FestiwalMilosza/posts/2892055547496114?notif_id=1584605724703025&notif_t=page_post_reaction

Страница Facebook, на которой будут размещены видео: https: // www.facebook.com/FestiwalMilosza/

Манчестер

Поэты Манчестера будут читать об их связи с деревьями и природой. Стихи будут распространяться в течение дня. www.twitter.com/mcrcityoflit

Гейдельберг

Группа авторов из Гейдельберга решила провести прямую трансляцию под названием «Des dunklen Lichtes voll» (цитата Гельдерлина: более или менее сказано «полный темного света»).Он состоится в пятницу, 20 марта (так как это день рождения Гёльдерлина), и они также распространят видео в субботу, чтобы продвигать Всемирный день поэзии.

Чтение, организованное самими авторами, будет проходить на YouTube в пятницу с 20:00 до 21:30 по адресу https://www.youtube.com/channel/UC6eXx3-ZR6_fsEeR8lSkvzg.

Они также попытаются напрямую поделиться им на странице «LiteraturstadtHeidelberg» в Facebook, вот ссылка на мероприятие в Facebook: https: // www.facebook.com/events/238636480600022/

Кроме того, вместе с Мангеймом и близлежащим городом Лорш они начали этот год, чтобы отметить WPD, опубликовав свои мероприятия в этот день на общем веб-сайте: www.metropolpoesie.de

Мельбурн

Сбор мультидисциплинарной группы людей для распаковки стихотворения и его интерпретации как мультисенсорного опыта. Вместе они решат вопрос о том, что можно сделать, чтобы передать стихотворение максимально инклюзивно концептуализированным опытом.Присоединяйтесь к запуску онлайн на https://us04web.zoom.us/s/359937613

Рейкьявик

Литературный город Рейкьявик отметит Всемирный день поэзии 2020 года шестью новыми поэтическими видео. Члены поэтического коллектива из Рейкьявика Svikaskáld (Поэты-самозванцы) прочитают стихотворение по выбору других поэтов, исландских или зарубежных, и расскажут о своих стихах. Чтения будут на исландском языке, так как иностранные стихи были переведены. Видео будут с английскими субтитрами.https://www.facebook.com/BokmenntaborginReykjavik/

Ноттингем

Интернет-празднование Всемирного дня поэзии и Всемирного дня леса в сотрудничестве с Sherwood Forest. Послушайте зарождающиеся рассказы онлайн: https://nottinghamcityofliterature.com

Любляна

Поэт и организатор литературных мероприятий Игнор Деян Кобан будет читать свои стихи и подборку стихов других поэтов в течение всего дня — в прямом эфире на Facebook.